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      細胞房設計

      來源:蘇州邁萊柏系統(tǒng)工程有限公司發(fā)布時間2021.09.16


      無菌操作區(qū)


      無菌操作區(qū)是只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,較易造成污染。

      因此,接種工作要在空氣經(jīng)過滅菌的環(huán)境里進行,小規(guī)模的無菌環(huán)境可利用超凈工作臺創(chuàng)造,大規(guī)模的需建無菌室。

      理想的無菌操作室應劃為三部分∶

      1、更衣室:供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

      2、緩沖間:位于更衣間與操作間之間,用于準備工作,還有防止污染的作用,以保證操作間的無菌環(huán)境,同時可放置恒溫培養(yǎng)箱以及必需的小型儀器。

      3、無菌操作間:無菌操作間則專用于無菌操作、細胞培養(yǎng),其大小要適當,且其頂部不宜過高以保證紫外線的滅菌效果﹔墻壁光滑無死角以便清洗和消毒,無菌操作間容積小且為密閉式,一般無菌操作間的空氣消毒用紫外線燈,有的實驗室使用無臭氧紫外線消毒器或電子消毒滅菌器。

      凈化工作臺∶操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種:(a)側流式或稱垂直式(b)外流式或稱水平層流式。


      孵育區(qū)

      孵育區(qū)也稱培養(yǎng)區(qū),本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。


      制備區(qū)

      制備區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。應設有試劑柜、器械柜、實驗臺和上水道、電源等,配備的主要儀器設備有水純化裝置、天平、微波爐、pH計、抽氣泵、電爐、培養(yǎng)分裝器、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶等。

      在有天平、pH計、磁力拌器等設備下完成制備以后,應在無菌操作臺進行過濾除菌。液體制備直接關系組織細胞養(yǎng)的成敗,因此必須嚴格無菌操作。


      儲藏區(qū)

      儲藏區(qū)主要存放各類冰箱、干燥箱、液氫罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氫溫度-196℃。

      細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般為4℃下存放30min。轉放-20 ℃ 1 h,再轉入-80~-70℃過夜,之后才可以轉移到液氫內(-196℃)。因此儲存區(qū)必須配備冰箱、低溫冰箱、超低溫冰箱和液氫罐等設備。


      清潔和消毒滅菌區(qū)

      清潔和消毒滅菌區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作,應備有高壓蒸汽滅菌鍋、細菌過濾設備、電熱干燥箱、消毒柜、排風設備等。


      細胞實驗室的建設要求

      環(huán)境要求

      溫度:儀器還是操作對溫度沒有特殊要求,維持舒適的溫度即可,比如18~26度。

      濕度:過高的濕度會導致微生物的滋生,所以建議正常維持濕度在70%以下。

      潔凈度:細胞實驗對潔凈區(qū)并沒有要求,細胞實驗里面只有細胞操作的時候要求無菌的環(huán)境,這時要求有局部的百級,通常可以利用超凈臺或者生物安全柜來實現(xiàn),不過有時候為了有個更好一點的環(huán)境,減小超凈臺過濾器更換的時間,會維持室內的潔凈度,比如萬級的潔凈度。

      無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行。

      在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。

      照明︰滿足實驗用的操作照度,通常在300LUX。

      維護結構要求

      雖然實驗的操作對大環(huán)境沒有特殊要求,不過最好能有不產(chǎn)塵、不積塵的環(huán)境,能保證室內的清潔,并且易于清洗、不容易滋生微生物,所以在選擇維護結構時,選用彩鋼板、醫(yī)療板等潔凈板材是比較好的選擇,為了保證室內的通透性,可以布置密閉窗。

      消毒

      通常做完實驗后,都需要做終末消毒,室內需要安裝紫外燈,利用紫外燈對空氣和表面消毒。


      細胞實驗室建設的注意事項

      1、放置細胞培養(yǎng)的實驗室,空調需要能保證在冬季能制冷,特別是在密閉的環(huán)境里,培養(yǎng)箱等設備的散熱量會比較大,導致室內溫度過高。

      2、如果設計成凈化實驗室,就需要按凈化實驗室的要求去做,如果做的細胞涉及到生物安全,則必須按照生物安全實驗室去設計,具體根據(jù)所做實驗的種類,來確定實驗室的設計要求以及選擇的設備,是選擇超凈工作臺還是生物安全柜。

      3、從事臨床細胞治療的,需要按照具體的規(guī)范要求建設。










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